Asosiy kirish:
Multipleks immunohistokimyo (mIHC) printsipi shundan iboratki, to'qima bo'limlaridagi antigen birlamchi antikor bilan maxsus bog'lanadi. Keyin, birlamchi antikor bilan bog'lanish uchun horseradish peroksidaza (HRP) bilan konjugatsiyalangan ikkilamchi antikor qo'shiladi. Tiramin floresan substratini qo'shgandan so'ng, nfaollashtirilgan tiramin floresein substratlari HRP-katalizlangan vodorod periks bilan faollashadi.. Flüoresein substrati qo'shilgandan so'ng, faollashtirilmagan tiramin floresein substrati vodorod peroksid ishtirokida HRP tomonidan katalitik faollashtiriladi. Faollashtirilgan substrat yaqin atrofdagi oqsil qoldiqlari, shu jumladan triptofan, histidin va tirozin bilan kovalent tarzda bog'lanadi, bu esa barqaror antigen-fluoresein bog'lanishiga imkon beradi.
Multipleks yorliqlash tajribalarida oldingi turdagi kovalent bog'lanmagan birlamchi va ikkilamchi antikorlarni issiqlik ta'mirlash yoki antikor elimenti yordamida yuvish mumkin. Keyinchalik, birlamchi-HRP ikkilamchi antikorining keyingi bosqichi inkubatsiya qilinadi, so'ngra boshqa tirozin flüoresein substrati qo'llaniladi. Bu jarayon bir nechta yorliqlash bosqichiga erishish uchun takrorlanishi mumkin. Har bir tizimda bir vaqtning o'zida faqat bitta antikor inkubatsiya qilinganligi sababli, antikorlarning o'zaro reaktivligi yoki asosiy va ikkilamchi antikorlarni moslashtirish zarurati haqida tashvishlanmaydi, bu eksperimental dizaynda turli turlardan antikorlarni tanlash va moslashtirish bilan bog'liq muammolarni sezilarli darajada kamaytiradi.
To'plam quyidagi bir yoki bir nechtasini o'z ichiga olgan maxsus tiramin floresan bo'yoqlarini o'z ichiga oladi: TYR-480Plus, TYR-520Plus, TYR-570Plus, TYR-620Plus, TYR-690Plus va TYR-780Plus. Ushbu lyuminestsent bo'yoqlar alohida yoki kombinatsiyalangan holda ishlatilishi mumkin, bu bitta, ikkita, uch yoki undan ham murakkab flüoresansni kuchaytirish va gomologik antikorlarni belgilash imkonini beradi, bu to'plamning ko'p qirraliligini sezilarli darajada oshiradi.
Bizning Multi Fluorescence Staining Plus (mIHC) to'plamlari hozirda 9 ranggacha bo'lishi mumkin. Bo'yoq birikmalari quyidagi jadvalda batafsil tavsiflangan:
Kit komponentlari:
TYR-***Plyus lyuminestsent bo'yoqlar, TSA buferi, HRP echkiga qarshi sichqoncha/quyon universal ikkilamchi antikor, DAPI binoni eritmasi (foydalanishga tayyor), Antikor erituvchi, 3% vodorod periks.
Multi Fluorescence Staining Plus ning afzalliklari(mIHC) To'plamlar:
1.Yuqori sezuvchanlik, an'anaviy TSA tahlil to'plamlaridan 10-50 baravar yuqori,
2.Juda kuchli signalga ega bo'lishdan ehtiyot bo'ling; Agar signal juda kuchli bo'lsa, bo'yoq kontsentratsiyasi / reaktsiya vaqti / birlamchi antikor kontsentratsiyasi kamayadi,
3.Signal juda past bo'lsa, bo'yoq konsentratsiyasini / reaktsiya vaqtini / asosiy antikor kontsentratsiyasini oshiring;
4.Multi Fluorescence Staining Plus (mIHC) to'plamlarining kontsentratsiyasi qanchalik yuqori bo'lsa, signal shunchalik yuqori bo'ladi; 1: 50 eng kuchli signalni olishi mumkin va 1: 500 an'anaviy TSA to'plamining signaliga teng.
5.Multi Fluorescence Staining Plus(mIHC) to'plami lyuminestsent bo'yoqlarga kuchli so'ndiruvchi qarshilikka ega va butun jarayon davomida quyosh nuriga ta'sir qilishni talab qilmaydi. Bundan tashqari, foydalanish paytida qorong'i muhitda ishlashni talab qilmaydi, lekin quyosh nuriga ta'sir qila olmaydi.
Operatsion binoni jarayoni:
Foydalanishda tasvirlash misoli bizningMultifloresanli binoni Plus to'plamis:
(A) Inson fallop naychalari to'qimalarining indeksi A (570 sariq) + indeks B (520 yashil) + indeks C (690 kukun);
(B) Sichqoncha buyrak to'qimalarining indeksi A (570 sariq) + indeks B (520 yashil) + indeks C (690 kukun);
(C) Odamning oshqozon saratoni o'simtasi indikatori A (690 kukun) + indikator B (620 qizil) + indikator C (570 sariq) + indikator D (520 yashil); (D) Inson ichak to'qimalarining indeksi A (570 sariq) + indeks B (520 yashil) + indeks C (690 pushti) + indeks D (620 qizil) + indeks E (480 yashil).
