Nguyên tắc giới thiệu:
Nguyên lý của Miễn dịch mô hóa học đa thành phần (mIHC) là kháng nguyên trên các phần mô liên kết đặc hiệu với kháng thể chính. Sau đó, một kháng thể thứ cấp liên hợp với peroxidase cải ngựa (HRP) được thêm vào để liên kết với kháng thể chính. Sau khi thêm chất nền huỳnh quang tyramine, Nchất nền tyramine fluorescein được kích hoạt được kích hoạt bởi hydrogen peroxide xúc tác bởi HRP. Khi thêm chất nền fluorescein, chất nền tyramine fluorescein chưa hoạt hóa được kích hoạt xúc tác bởi HRP khi có mặt hydrogen peroxide. Chất nền đã hoạt hóa liên kết cộng hóa trị với các gốc protein gần đó, bao gồm tryptophan, histidine và tyrosine, cho phép liên kết kháng nguyên-fluorescein ổn định.
Trong các thí nghiệm đánh dấu đa thành phần, các kháng thể sơ cấp và thứ cấp không liên kết cộng hóa trị từ vòng trước có thể được rửa sạch bằng cách sử dụng nhiệt sửa chữa hoặc dung môi rửa kháng thể. Sau đó, vòng kháng thể thứ cấp HRP sơ cấp tiếp theo được ủ, tiếp theo là ứng dụng một chất nền tyrosine fluorescein khác. Quá trình này có thể được lặp lại để đạt được nhiều bước đánh dấu. Vì chỉ có một kháng thể được ủ tại một thời điểm trong mỗi hệ thống, nên không có lo ngại về phản ứng chéo kháng thể hoặc nhu cầu khớp kháng thể sơ cấp và thứ cấp, giúp giảm đáng kể những thách thức liên quan đến việc lựa chọn và khớp kháng thể từ các loài khác nhau trong thiết kế thử nghiệm.
Bộ dụng cụ chứa thuốc nhuộm huỳnh quang tyramine cụ thể, bao gồm một hoặc nhiều loại sau: TYR-480Plus, TYR-520Plus, TYR-570Plus, TYR-620Plus, TYR-690Plus và TYR-780Plus. Các thuốc nhuộm huỳnh quang này có thể được sử dụng riêng lẻ hoặc kết hợp, cho phép khuếch đại huỳnh quang đơn, đôi, ba hoặc thậm chí phức tạp hơn và gắn nhãn kháng thể tương đồng, giúp tăng cường đáng kể tính linh hoạt của bộ dụng cụ.
Của chúng tôi Bộ nhuộm huỳnh quang đa năng Plus (mIHC) hiện có thể đạt tới 9 màu. Các kết hợp thuốc nhuộm được trình bày chi tiết trong bảng dưới đây:
Các thành phần của bộ dụng cụ:
Thuốc nhuộm huỳnh quang TYR-***Plus, đệm TSA, kháng thể thứ cấp phổ biến HRP chống chuột/thỏ, dung dịch nhuộm DAPI (sẵn sàng sử dụng), dung dịch pha loãng kháng thể, 3% hydrogen peroxide.
Ưu điểm của nhuộm huỳnh quang đa năng Plus(mIHC) Bộ dụng cụ:
1.Độ nhạy cao, cao hơn 10-50 lần so với bộ xét nghiệm TSA thông thường,
2.Cẩn thận không nên để tín hiệu quá mạnh; Nếu tín hiệu quá mạnh, nồng độ thuốc nhuộm/thời gian phản ứng/nồng độ kháng thể chính sẽ bị giảm,
3.Nếu tín hiệu quá thấp, hãy tăng nồng độ thuốc nhuộm/thời gian phản ứng/nồng độ kháng thể chính;
4.Nồng độ của Bộ nhuộm huỳnh quang đa năng cộng thêm (mIHC) càng cao thì tín hiệu càng được tăng cường theo cấp số nhân; 1: 50 có thể thu được tín hiệu mạnh nhất và 1: 500 tương đương với tín hiệu của bộ TSA thông thường.
5.Bộ nhuộm huỳnh quang đa năng (mIHC) có khả năng chống dập tắt mạnh đối với thuốc nhuộm huỳnh quang và không cần tiếp xúc với ánh sáng mặt trời trong suốt quá trình. Nó cũng không cần hoạt động trong môi trường tối trong quá trình sử dụng, nhưng không được tiếp xúc với ánh sáng mặt trời.
Quy trình nhuộm hoạt động:
Ví dụ về hình ảnh sử dụng của chúng tôiBộ nhuộm huỳnh quang đa năng PlusS:
(A) Mô ống dẫn trứng của người có chỉ số A (570 màu vàng)+chỉ số B (520 màu xanh lá cây)+chỉ số C (690 bột);
(B) Chỉ số mô thận chuột A (570 màu vàng) + chỉ số B (520 màu xanh lá cây) + chỉ số C (bột 690);
(C) Chỉ số khối u ung thư dạ dày ở người A (bột 690) + chỉ số B (đỏ 620) + chỉ số C (vàng 570) + chỉ số D (xanh lá cây 520); (D) Chỉ số mô ruột ở người A (vàng 570) + chỉ số B (xanh lá cây 520) + chỉ số C (hồng 690) + chỉ số D (đỏ 620) + chỉ số E (xanh lá cây 480).
