கொள்கை அறிமுகம்:
மல்டிபிளக்ஸ் இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரியின் (mIHC) கொள்கை என்னவென்றால், திசுப் பிரிவுகளில் உள்ள ஆன்டிஜென் முதன்மை ஆன்டிபாடியுடன் குறிப்பாக பிணைக்கிறது. பின்னர், ஹார்ஸ்ராடிஷ் பெராக்ஸிடேஸுடன் (HRP) இணைக்கப்பட்ட இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடி முதன்மை ஆன்டிபாடியுடன் பிணைக்க சேர்க்கப்படுகிறது. டைரமைன் ஃப்ளோரசன்ஸ் அடி மூலக்கூறைச் சேர்த்த பிறகு, n (n) (ஆங்கிலம்)செயல்படுத்தப்பட்ட டைரமைன் ஃப்ளோரசெசின் அடி மூலக்கூறுகள் HRP-வினையூக்கிய ஹைட்ரஜன் பெராக்சைடால் செயல்படுத்தப்படுகின்றன.. ஒரு ஃப்ளோரசெசின் அடி மூலக்கூறைச் சேர்க்கும்போது, செயல்படுத்தப்படாத டைரமைன் ஃப்ளோரசெசின் அடி மூலக்கூறு ஹைட்ரஜன் பெராக்சைடு முன்னிலையில் HRP ஆல் வினையூக்கமாக செயல்படுத்தப்படுகிறது. செயல்படுத்தப்பட்ட அடி மூலக்கூறு டிரிப்டோபான், ஹிஸ்டைடின் மற்றும் டைரோசின் உள்ளிட்ட அருகிலுள்ள புரத எச்சங்களுடன் கோவலன்ட் முறையில் பிணைக்கிறது, இது நிலையான ஆன்டிஜென்-ஃப்ளோரசெசின் பிணைப்பை அனுமதிக்கிறது.
மல்டிபிளக்ஸ் லேபிளிங் சோதனைகளில், முந்தைய சுற்றில் இருந்து கோவலன்ட் முறையில் பிணைக்கப்படாத முதன்மை மற்றும் இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடிகளை வெப்ப பழுதுபார்ப்பு அல்லது ஆன்டிபாடி எலுவென்ட் பயன்படுத்தி கழுவலாம். பின்னர், அடுத்த சுற்று முதன்மை-HRP இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடி அடைகாக்கப்படுகிறது, அதைத் தொடர்ந்து வேறு டைரோசின் ஃப்ளோரசெசின் அடி மூலக்கூறைப் பயன்படுத்துகிறது. பல லேபிளிங் படிகளை அடைய இந்த செயல்முறையை மீண்டும் செய்யலாம். ஒவ்வொரு அமைப்பிலும் ஒரே நேரத்தில் ஒரு ஆன்டிபாடி மட்டுமே அடைகாக்கப்படுவதால், ஆன்டிபாடி குறுக்கு-வினைத்திறன் அல்லது முதன்மை மற்றும் இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடிகளை பொருத்த வேண்டிய அவசியம் குறித்து எந்த கவலையும் இல்லை, இது சோதனை வடிவமைப்பில் வெவ்வேறு இனங்களிலிருந்து ஆன்டிபாடிகளைத் தேர்ந்தெடுத்து பொருத்துவதில் தொடர்புடைய சவால்களைக் கணிசமாகக் குறைக்கிறது.
இந்த கிட் குறிப்பிட்ட டைரமைன் ஃப்ளோரசன்ட் சாயங்களைக் கொண்டுள்ளது, இதில் பின்வருவனவற்றில் ஒன்று அல்லது அதற்கு மேற்பட்டவை அடங்கும்: TYR-480Plus, TYR-520Plus, TYR-570Plus, TYR-620Plus, TYR-690Plus, மற்றும் TYR-780Plus. இந்த ஃப்ளோரசன்ட் சாயங்களை தனித்தனியாகவோ அல்லது இணைந்துவோ பயன்படுத்தலாம், இது ஒற்றை, இரட்டை, மூன்று அல்லது இன்னும் சிக்கலான ஃப்ளோரசன்ஸ் பெருக்கம் மற்றும் ஹோமோலோகஸ் ஆன்டிபாடி லேபிளிங்கை அனுமதிக்கிறது, இது கிட்டின் பல்துறைத்திறனை பெரிதும் மேம்படுத்துகிறது.
நமது மல்டி ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்டைனிங் பிளஸ் (mIHC) கருவிகள் தற்போது 9 வண்ணங்கள் வரை அடையலாம். சாய சேர்க்கைகள் கீழே உள்ள அட்டவணையில் விவரிக்கப்பட்டுள்ளன:
கிட் கூறுகள்:
TYR-***பிளஸ் ஃப்ளோரசன்ட் சாயங்கள், TSA இடையகம், HRP ஆடு எதிர்ப்பு எலி/முயல் உலகளாவிய இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடி, DAPI கறை படிதல் தீர்வு (பயன்படுத்தத் தயார்), ஆன்டிபாடி நீர்த்த, 3% ஹைட்ரஜன் பெராக்சைடு.
மல்டி ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்டைனிங் பிளஸின் நன்மைகள்(எம்ஐஎச்சி) கருவிகள்:
1.அதிக உணர்திறன், வழக்கமான TSA மதிப்பீட்டு கருவிகளை விட 10-50 மடங்கு அதிகம்,
2.மிகவும் வலுவான சமிக்ஞையாக இருக்காமல் கவனமாக இருங்கள்; சமிக்ஞை மிகவும் வலுவாக இருந்தால், சாய செறிவு/எதிர்வினை நேரம்/முதன்மை ஆன்டிபாடி செறிவு குறைக்கப்படும்,
3.சமிக்ஞை மிகவும் குறைவாக இருந்தால், சாய செறிவு/எதிர்வினை நேரம்/முதன்மை ஆன்டிபாடி செறிவை அதிகரிக்கவும்;
4.மல்டி ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்டெய்னிங் பிளஸ் (mIHC) கருவிகளின் செறிவு அதிகமாக இருந்தால், சிக்னல் அதிவேகமாக மேம்படுத்தப்படும்; 1:50 என்பது வலிமையான சிக்னலைப் பெற முடியும், மேலும் 1:500 என்பது வழக்கமான TSA கருவியின் சிக்னலுக்குச் சமம்.
5.மல்டி ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்டெய்னிங் பிளஸ் (mIHC) கிட், ஃப்ளோரசன்ட் சாயங்களுக்கு வலுவான தணிப்பு எதிர்ப்பைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் முழு செயல்முறையிலும் சூரிய ஒளியை வெளிப்படுத்த வேண்டிய அவசியமில்லை. பயன்பாட்டின் போது இருண்ட சூழலில் செயல்பட வேண்டிய அவசியமில்லை, ஆனால் சூரிய ஒளியை வெளிப்படுத்த முடியாது.
செயல்பாட்டு கறை படிதல் செயல்முறை:
இமேஜிங்கைப் பயன்படுத்துவதற்கான எடுத்துக்காட்டு நமதுமல்டி ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்டெய்னிங் பிளஸ் கிட்கள்:
(A) மனித ஃபலோபியன் குழாய் திசு குறியீடு A (570 மஞ்சள்)+குறியீட்டு B (520 பச்சை)+குறியீட்டு C (690 தூள்);
(B) எலி சிறுநீரக திசு குறியீட்டு A (570 மஞ்சள்)+குறியீட்டு B (520 பச்சை)+குறியீட்டு C (690 தூள்);
(C) மனித இரைப்பை புற்றுநோய் கட்டி காட்டி A (690 பவுடர்)+காட்டி B (620 சிவப்பு)+காட்டி C (570 மஞ்சள்)+காட்டி D (520 பச்சை); (D) மனித குடல் திசு குறியீடு A (570 மஞ்சள்)+குறியீட்டு B (520 பச்சை)+குறியீட்டு C (690 இளஞ்சிவப்பு)+குறியீட்டு D (620 சிவப்பு)+குறியீட்டு E (480 பச்சை).
