原理介绍：
多重免疫组织化学（mIHC）的原理是组织切片上的抗原特异性地与一抗结合。然后加入偶联辣根过氧化物酶（HRP）的二抗与一抗结合。加入酪胺荧光底物后， n非活化酪胺荧光素底物被 HRP 催化的过氧化氢激活。 添加荧光素底物后，未活化的酪胺荧光素底物在过氧化氢存在下被 HRP 催化活化。活化的底物与附近的蛋白质残基共价结合，包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸，从而实现稳定的抗原-荧光素结合。
在多重标记实验中，可以使用热修复或抗体洗脱液洗去上一轮的非共价结合的一抗和二抗。随后，孵育下一轮的一抗-HRP二抗，然后应用不同的酪氨酸荧光素底物。可以重复此过程以实现多个标记步骤。由于每个系统中每次只孵育一种抗体，因此无需担心抗体交叉反应或需要匹配一抗和二抗，从而大大减少了在实验设计中选择和匹配来自不同物种的抗体所带来的挑战。
本试剂盒含有特定的酪胺荧光染料，包括TYR-480Plus、TYR-520Plus、TYR-570Plus、TYR-620Plus、TYR-690Plus、TYR-780Plus中的一种或多种，这些荧光染料可单独使用或组合使用，可实现单重、双重、三重甚至更复杂的荧光扩增及同源抗体标记，大大增强了试剂盒的通用性。
我们的 Multi Fluorescence Staining Plus(mIHC) Kits 目前最多可实现 9 种颜色。染料组合详见下表：
套件组件：
TYR-***Plus 荧光染料、TSA 缓冲液、HRP 羊抗鼠/兔通用二抗、DAPI 染色溶液（即用型）、抗体稀释剂、3% 过氧化氢。
多重荧光染色的优势免疫组织化学 (mIHC) 套件：
1.灵敏度高，比传统 TSA 检测试剂盒高 10-50 倍，
2.注意不要让信号太强；如果信号太强，染料浓度/反应时间/一抗浓度会降低，
3.如果信号太低，增加染料浓度/反应时间/一抗浓度；
4.Multi Fluorescence Staining Plus(mIHC) Kits浓度越高，信号呈指数增强，1:50可获得最强信号，1:500则与常规TSA试剂盒的信号相当。
5.Multi Fluorescence Staining Plus(mIHC) Kit对荧光染料具有较强的抗淬灭性，全程无需暴露在阳光下，使用过程中也无需在黑暗环境下操作，但不能暴露在阳光下。
操作染色程序：
使用成像的示例 我们的多重荧光染色试剂盒s：
（A）人类输卵管组织索引A（570黄色）+索引B（520绿色）+索引C（690粉末）；
（B）小鼠肾脏组织索引A（570黄色）+索引B（520绿色）+索引C（690粉末）；
(C)人胃癌肿瘤指示剂A(690粉)+指示剂B(620红)+指示剂C(570黄)+指示剂D(520绿)；(D)人肠组织指示剂A(570黄)+指示剂B(520绿)+指示剂C(690粉色)+指示剂D(620红色)+指示剂E(480绿)。
